背景技術
肝素是廣泛存在于動物器官和小腸粘膜、肺等組織中的一種葡萄糖胺聚糖。在常規提取過程中，大量的蛋白質、多肽、氨基酸、核酸等雜質影響肝素鈉的提純過程，這些雜質在粗品肝素鈉中含量的多少直接影響肝素鈉產品活性和產品質量。
傳統工藝去除酶解液中的大分子蛋白質、多肽、氨基酸、核酸等雜質目前國內大多數采用的方法有兩種:一種是采用板框過濾、轉鼓、離心分離等傳統過濾方式或分離設備，這種過濾方式僅能濾除可視雜質及少量大顆粒雜質，而酶解液中還存在大量的難以濾除的水溶性蛋白雜質；另一種是采用添加絡合劑絮凝沉降(如通過加絡合劑、明礬、碳酸鈣、聚合氯化鋁等方法)或等電點沉淀的方法，這類方法能使絡合劑與蛋白絡合成較大顆粒，然后再通過板框過濾、離心過濾等傳統“死端過濾”“濾餅過濾”等過濾方式去除，這種方法缺點是絡合物加入量、配比濃度以及加入絡合劑的速度、周期有嚴格要求，而且需要一定的靜止時間，同時這種絡合劑由于與肝素鈉有一定的絡合作用易造成肝素活性的損失，現一般基本不再采用這種絡合方式。上述傳統工藝沿用已久，使用普遍，但這些傳統工藝只能將酶解液中大的懸浮物等固體物予以粗分離，無法將酶解液中大量存在的可溶性蛋白、雜糖、色素等予以分離。
具體內容
提供一種利用陶瓷膜去除粗品肝素鈉提取過程中雜質的方法，以克服現有技術存在的弊端。
為實現本發明目的，這種用陶瓷膜去除粗品肝素鈉中雜質的方法，其特征在于包括以下工藝步驟:
將豬小腸粘膜與水按1:6~8的質量比混合后依次加入NaCl和蛋白酶，然后升溫50~60°C后在攪拌下酶解3~5小時，所述NaCl的加入量為豬小腸粘膜質量的1/8~1/6，所述蛋白酶的加入量為豬小腸粘膜質量的0.2~0.4%；
將上述所得酶解液過濾后在50°C~60°C、0.2~0.3MPa下經5nm陶瓷膜過濾；
在上述過濾后的澄清液中加入離子交換樹脂后攪拌吸附6~8小時；
將上述吸附肝素鈉的離子交換樹脂用4~7%NaCl水溶液洗滌后，再用20~24%NaCl水溶液洗脫離子交換樹脂后得到含肝素鈉的洗脫液；
向上述所得洗脫液中加入85~95%乙醇，當溶液中乙醇濃度達40~50%(w/v)時，靜置沉淀2小時后脫水、干燥，得粗品肝素鈉，所述乙醇的加入量為洗脫液質量的2~4倍。
技術進步:
常溫密閉操作，保證產品活性，符合現在GMP認證要求
本發明酶解液是在密閉的管道和膜腔內循環過程中完成物料的分離過程，溶液不直接與大氣接觸，符合GMP生產要求。
分離精度高，過濾效率高
無機陶瓷膜膜層的孔徑分布很窄，5nm孔徑陶瓷膜絕對精度高，可保證酶解液中大量雜質無法輕易透過膜層，對雜質的截留率達99%以上，對酶解液中的大分子蛋白截留率遠高于傳統的過濾、絡合劑沉降等去除方式。
可大幅度提聞廣品收率
可限度收集酶解液雜質中的有效成分，提高產品的收率，與現有傳統濾袋、濾布、板框過濾式方法比較，收率可達99.5%。
可保證粗品肝素鈉質量
由于濾出液中少量小分子蛋白等雜質相對于傳統方法含量明顯減小，且透過液澄清透明，保證了產品質量的穩定性。
廢水排放量大大減小
陶瓷膜過濾去除溶液中的雜質，與傳統工藝中廢水排放污染比較，可限度減小排污，廢水中COD顯著降低，有效降低了污水處理費用，減輕了環保壓力。
濾液澄清透明，減輕后續吸附處理難度
陶瓷膜濾液大大簡化了后續離子交換除雜步驟和降低了后續離子交換樹脂污染程度，從而延長了離子交換樹脂使用壽命，離子交換樹脂使用壽命可延長40~50%，節省了樹脂輔料消耗費用。
無需添加助劑
由于膜過濾過程為簡單物理過濾過程，僅靠高精度的膜孔徑對物料組分進行分離，無需額外助劑進行絮凝，過濾結束后的濾渣由于無污染并含有高蛋白，可作為加工飼料或有機肥料回收。
綜上所述，本發明采用陶瓷膜過濾是基于多孔陶瓷介質的篩分效應而進行的物質分離技術，無機陶瓷膜具有聚合物分離膜所無法比擬的一些優點:耐高溫，可實現在線消毒；化學穩定性好，能抗微生物降解；對于有機溶劑侵蝕有良好的穩定性；機械強度高，有良好的耐高壓、耐沖刷性能；孔徑分布窄，分離性能高，滲透量大，可反復清洗再生，使用壽命長等優點。陶瓷膜應用于粗品肝素鈉純化過程，是采用其動態錯流過濾方式，即在壓力驅動下，酶解液在陶瓷膜管內側膜層表面以一定的流速高速流動，酶解液沿與陶瓷膜垂直方向透過微孔膜，大分子蛋白質(或固體顆粒)被膜截留，使酶解液與雜質達到分離和純化的目的，本發明較傳統的濾布、濾網過濾及加絡合劑方法，具有所得酶解液清澈、雜質含量更低、肝素無損失、廢液對環境污染更小、后期吸附更便捷等優點。能在肝素鈉不受損失的情況下，限度的去除粗品肝素鈉提取過程中的雜質，從而保證了產品質量及收率，本發明生產成本合理，適合于大規模工業化生產。